兔卵的冷凍 - 農業知識入口網

　　兔卵取自成熟的白色紐西蘭種母兔11頭和毛皮生產用的雷克斯種母兔四頭之卵巢。卵巢先以組織培養液mDPBS來洗滌三次，再放入含有18%胎牛血清的培養液中，以刀尖刺破卵巢上濾泡，平均每頭兔可回收到15個卵，數目1至78不等。兔卵的急速冷凍用保護為Ethylene Glycol (EG)和Ficoll (F70)，分別先以18%胎牛血清的mDPBS來調配成40% EG和18% F70溶液，兩種溶液再以2:1容積比調和成最終冷凍溶液。共計有182個卵吸置入冷凍溶液中，每頭兔卵分吸填入0.25ml麥管，封口後至已浸置10分鐘時，訧把麥管直接投入液態氮，完成急速冷凍步驟。解凍時，冷凍麥管自液態氮桶取出訧直接投入20℃ 水浴槽，一分鐘後取出再擠出解凍卵於1.0M蔗糖溶液中，經10分鐘後檢視外觀完整的卵，完整率為82.4±20.2%。完整的解凍卵經檢出並培養於18%胎牛血清的mDPBS中20分鐘，存活率為77.5±20.3%。存活卵的直徑為145.2±17.1um，透明帶厚度為18.5±2.8um，卵細胞直徑為108.0±14.9um。存活卵經活性Rhodamine 123螢光染色後，觀察其粒線體分佈均勻等級，有2.8%的存活卵仍具有如新鮮卵般的均勻分佈相，餘依序有11.2、23.4、14.0、22.4和26.2%的存活卵之粒線體分佈呈次均勻分佈、粉圓狀聚集、油滴狀佈、蜂巢式孔洞和片塊狀。


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