山蘇主題館

首頁 / 山蘇故事屋 / 培育房 / 組織培養的方法二

取消列印

列印本頁

組織培養的方法二

發文日：97/09/15

(二)葉原體培養

台灣山蘇花的葉原體存在於其短縮莖裏，將覆蓋於上面黑而多的鱗片拔除之後，用解剖刀取出內部白色微粘的葉原體，分切成0.5公分×0.5公分×0.5公分大小，先用清水清洗後再用75%酒精消毒20秒鐘，其次以2%漂白水消毒20~30分鐘，再以1%漂白水消毒20分鐘，最後以無菌水沖洗二次，可看見培植體已經白化，取白化的葉原體接種在添加5ppm BA的1/2MS培養基上，一個月後，將轉成綠色的培植體分切成2~4塊，再放入同配方的培養基上培養，三個月左右可見到芽原體的形成；將芽原體培養在不含生長素的1/2MS半固體培養基上，可直接長出幼孢子體，若將芽原體分切數塊放入1/2MS液體培養基上培養二週則可形成二倍的癒合組織和芽原體，將這些組織取出放入添加0.2~5ppm BA的1/2MS半固體培養基上，則可形成2~5倍的孢子芽，試驗顯示氮鹽減半，蔗糖20公克/公升的1/2MS培養基較有利於芽體的形成，添加酪素水解物(casein hydrolysate) 250mg/1則明顯有利用芽體的生長，將其分切後移入不含生長素的1/2MS半固體培養基上，則會長出葉片和根，成一完整植株，待其長到約3公分左右，即可移出馴化定植，一般以保水力佳的水草介質較有利於瓶苗的成活。

台灣山蘇花葉原體 → 培養於1/2MS培養 → 芽原體及癒合組織形成 →
基形成綠色突起

由芽原體發育而成的幼孢子體 → 幼孢子體之成長 →

幼孢子體之成長 → 幼孢子體植株