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消費者知識庫

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標題四季蔥健康種苗快速繁殖技術 1.分蔥潛隱病毒檢測與無病毒新梢之誘導-討論
內文

討論
一、青蔥病毒病與病毒檢測
病毒病是一種系統性病害,植株一旦罹患病毒病,全株各器官都受侵襲,造成產量及品質之降低,且無農用藥劑可以防治,病毒又可隨無性繁殖器官傳遞至下一代,再經媒介傳播即大量蔓延。台灣蔥科作物中大蒜病毒病發生率有報告為100% (林,1984;林、曾,1988),經鑑定其病毒種類有OYDV、TMV、SLV、GCLV、LYSV、SYSV、MbFV等,至於先前認為造成大蒜嵌紋病的的GMV(翁與韓,1978; Lee et al., 1979)可能是LYSV等potyviruses複合感染所致(Barg et al., 1997; Bos, L. 1983;Van Dijk, 1993a), GLV (鄧等,1991;Fukami et al., 1989; Lee et al., 1979; Sako et al., 1991;Sako et al., 1994 )已重新歸類為SLV的garlic strain (SLV-G) (Van Dijk, 1993b),至於青蔥黃條斑紋病毒 (Welsh onion yellow stripe virus, WoYSV) (Liu et al., 1996, Van Dijk, 1993a )已重新鑑定為SYSV的一種(Van der Vlugt et al., 1999)。在台灣進行青蔥病毒檢定時, LYSV、SYSV、OYDV及MLO感染青蔥均有明顯病徵可以觀察,在組織培養起步時即可淘汰此類材料,培養當中目視植株出現病徵亦可中止繁殖,唯有SLV感染並不造成明顯病徵,需另以免疫分析檢測。SLV寄主範圍包括大蒜、蔥、洋蔥及韭等蔥科作物,在大蒜軟骨品系有較高的發生率(鄧,1991),青蔥與大蒜交互感染的機會很高,且呈無病徵系統性感染,多年後感病株即有生長退化的現象。又SLV在台灣的蔥及韭上都有分離出來之記錄(鄧,1991;Barg et al.,1994;Tsuneyoshi et al.,1998),且各分離株之間均有共同的血清反應,因此利用其中一種抗體即可檢測所有的SLV型系,本試驗亦證實利用SLV-WO 或SLV-CL的抗體都可經ELISA測出蔥株內的SLV,且在檢體稀釋1/10 - 1/1000之間皆為有效濃度,因此例行的病毒檢測時檢體定量只要在此範圍內即可。同時經DTBIA顯示SLV罹病蔥苗全株組織均有病毒反應,因此在病毒檢測時並不會因為採樣的偏差造成偽陰性(false-negative)的結果。
二、利用組織培養技術生產無病毒病之種苗
無性繁殖之植物營養體一旦感染病毒後,往往造成收量及品質低落,而生長點或莖頂培養,為去除其體內病毒可行方法。本研究以感病之青蔥莖基盤、生長點、生長點帶一枚葉原體、生長點帶二枚葉原體等作為培植體,由於病毒之分佈以維管束為運輸之途徑,而莖基盤或葉原體基部已有維管束分佈(王與黃,1974;Roberts et al.,1997),試驗結果僅以生長點頂分生組織為培殖體,可獲得無病毒青蔥。利用TDZ誘導經240日培養每個生長點最多可產生10.4個植株,相較於田間無性繁殖約可生產27株,生產速率較低,張氏(1997)指出健康種苗之增殖量必需能高於病原之再感染率,才能取代田間已感病之個體,降低田間病原密度,達到延緩病害流行之效果,因此種苗能否大量快速生產乃防治能否成功之關鍵。而在分蔥及大蒜之研究,分別指出切取莖基盤作為微體繁殖之材料,比切取生長點有較多之新梢生成(陳,1997;Ayabe,1998)。青蔥利用莖基盤為培植體,則經200日培養,每個莖基盤可產生66個植株(如表一),明顯較生長點生產量為高。若無法獲得無病毒植株,則挑取生長點置放於MS培養基發育成植株需60日,再切取莖基盤,即可誘導40-60個植株,整個時期約240-260日與生長點直接誘導產生新梢時間相同,新梢數目卻增加4至6倍。
TDZ被大量用於多種作物,在蔥科作物僅分蔥莖頂培養(陳,1997),表二結果顯示0.1mg/L TDZ即有誘導產生新梢之能力,但是TDZ與NAA同時存在一個培養基中,會減少新梢產生之數目,所以單獨使用TDZ對於誘導新梢產生之效果較佳。由圖五得知,莖基盤經TDZ處理42日即有最佳誘導新梢數目。與Lu(1993)指出植物在TDZ的培養基中最好不要超過8星期一致。不同細胞分裂素對青蔥莖基盤誘導新梢之效果比較試驗顯示,TDZ較BA或kinetin有較佳之效果,各細胞分裂素為1mg/L,TDZ可誘導43個、BA可誘導29個、kinetin可誘導17個新梢。5mg/L時,TDZ有62個、BA有39個、kinetin有21個新梢(如圖七)。因為TDZ不易被cytokinin oxidase分解,且較BAP或zeatin具生理活性(Lu,1993)。

文件屬性研究報告
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作者楊宏瑛;鄧汀欽;張武男
知識樹分類消費者知識庫 > 園藝類 > 蝴蝶蘭
公佈日期2011/8/19

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